Тіогліколеве середовище

Тіогліколеве середовище - це середовище, яке використовують для контролю стерильності різних біоматеріалів, а також для культивування широкого кола аеробних, мікроаерофільних і анаеробних бактерій.

Склад

Гідролізат казеїну - 15,00 грам/літр

Дріжджовий екстракт - 5,00 грам/літр

Глюкоза - 5,50 грам/літр

Натрію хлорид - 2,50 грам/літр

L-цистин - 0,50 грам/літр

Натрію тіогліколят - 0,50 грам/літр

Резазурін - 0,001 грам/літр

Агар-агар - 0,75 грам/літр

Кінцеве значення рН (при 25°З) 7,1 ± 0,2

Приготування

Розмішати 29,75 г порошку М009 або в 1000 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм (121°С) протягом 15 хв. Охолодити до 25°С і залишити для зберігання в темному прохолодному місці (при температурі нижче за 25°С).

Примітка : якщо більш, ніж третина середовища зверху стала рожевого кольору, її можна один раз відновити, прогрівши у киплячій водяній бані або струмені пари до зникнення рожевого забарвлення.

Принцип і оцінка результату

Це середовище запропонував Бревер [1] для швидкого культивування аеробів, а також анаеробів (в зв'язку з додаванням редукуючої речовини і невеликої кількості агар-агару). Американські фахівці [2][3] рекомендували вказані середовища для тестів на стерильність антибіотиків, біоматеріалів, харчових продуктів, а також для визначення фенолового коефіцієнту і спороцидних властивостей дезінфектантів. Разом з тим, середовища призначені для дослідження прозорих рідин і водорозчинних матеріалів. Глюкоза, гідролізат казеїну, дріжджовий екстракт, м'ясний екстракт і L-цистин дають поживні речовини для розмноження бактерій. Тіогліколят натрію знижує окислювально-відновлювальний потенціал, а також нейтралізує бактеріостатичний ефект з'єднань ртуті і інших важких металів, що знаходяться в досліджуваному матеріалі. Будь-яке підвищення концентрації кисню супроводиться зміною кольору спеціального індикатора редокс-потенціалу резазуріна на червоний [4][5][6]. Низький редокс-потенціал допомагає підтримувати невелика кількість агару в середовищі[7].

Контроль якості

Зовнішній вигляд порошку

Гомогенний сипучий жовтий порошок.

Колір і прозорість готового середовища

Готове середовище має світло-солом'яне забарвлення, прозоре або злегка опалесціює; не більше за 10% в його верхній частині може забарвлюватися в рожевий колір при зберіганні.

Кислотність середовища

При 25°С водний розчин М009 (2,97% вага/об‘єм) має рН 7,1 ± 0,2.


Культуральні властивості

Ростові характеристики референс-штамів через 48-72 год при 35°С.

Штам мікроорганізмів (АТСС) Ріст

  • Bacillus subtilis (6633) - Рясний
  • Candida albicans (10231) - Рясний
  • Clostridium sporogenes (11437) - Рясний
  • Micrococcus luteus (9341) - Рясний

Neisseria meningitidis (13090) - Рясний

Streptococcus pyogenes (19615) - Рясний

  • Bacteroides vulgatus (8482) - Середній або хороший

Примітка: * культуру можна інкубувати при 25-30°С протягом 2-7 днів.

Умови і терміни зберігання

Порошок зберігати при температурі нижче за 25°С. Вжити до дати, вказаної на етикетці. Готове середовище зберігати при кімнатній температурі в темряві.

Посилання
  1. Brewer, 1940, J. Am. Med. Assoc., 115:598.
  2. U. S. Pharmacopeia, 2002, USP 25/NF 20, Asian Edition, United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.
  3. Cunniff P. (Ed.), 1995, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th ed., AOAC, Washington, D.C.
  4. Marshall, Gunnison and Luxen, 1940, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 43:672.
  5. Nungester, Hood and Warren, 1943, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 52:287.
  6. Portwood, 1944, J. Bact., 48:255.
  7. MacFaddin J.F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore.
This article is issued from Wikipedia. The text is licensed under Creative Commons - Attribution - Sharealike. Additional terms may apply for the media files.